欢迎来到上海金沙!

021-54845833/15800441009

品质保证 · 金沙试剂

首页 >>金沙新闻>>聚合酶链式反应(PCR)的原理及操作步骤

金沙新闻

金沙新闻

聚合酶链式反应(PCR)的原理及操作步骤

生物技术发展至今,为如今的科研技术带来了突破,比如金沙常见的 ELISA PCR 等试剂盒技术。今天,就 PCR 技术小蔚为各位唠叨一下其原理和步骤。

pcr试剂盒

PCR 又叫聚合酶反应或简称 PCR ,它提供了一种复制更多 DNA 部分的方法。 PCR 这项技术不需要在细胞中发生,实验过程中常用的有 PCR 试剂盒,可以利于试剂盒进行实验。写到这里,你可能想知道 PCR 是如何工作的?为什么要复制更多 DNA 的某些特定部分?接下来鉴定回答一下这两个问题。

PCR 工作原理

金沙想要复制 DNA 部分,金沙需要了解一下 PCR 实验组成,通常 PCR 组成包括 DNA 模版

引物、 DNA 聚合酶。由于 PCR 使用是热量,因此使用的 DNA 聚合酶通常是耐热型 DNA 聚合酶。常用到的聚合酶是 Taq 聚合酶,一种耐热的聚合酶。 Taq DNA 聚合酶来源于 Thermus aquaticus ,这是一种在 70°C 以上温度下生长的极端嗜热真杆菌。这意味着 Taq DNA 聚合酶在大约 72°C 温度下发挥最佳酶活性。这种热稳定性使 Taq 聚合酶成为 PCR 的理想选择。


PCR步骤


金沙还需要 DNA 核苷酸来构建 DNA 聚合酶,金沙可以通过三个步骤来了解 PCR 构成。金沙这里将在用一个双链 DNA 分子进行说明,并假设这是金沙需要复制的。

变性。酶变性使用一种方法是使用热量,此步骤涉及添加分离 DNA 分子两条链所需的热量。

退火。现在已经被热量分开的两条 DNA 链将被量确并被引物链接起来,此步骤温度应允许引物与您想要扩增(既复制)的特定 DNA 片断结合。

DNA 合成。通过 DNA 合成,金沙将制造更多 DNA 副本。为此, DNA 聚合酶将开始在两条链上工作,并将实验 DNA 核苷酸作为其构建材料来扩增 DNA 。需要注意的是,这一步的温度可能比上一步要高一些。适合所用特定 DNA 聚合酶的理想温度。

通过上述步骤,完成一个循环后,你就会得到两个双链 DNA 分子。上述 PCR 实验步骤有点类似于细胞内 DNA 复制的情况。你可以重复上述步骤,现在你有两个双链 DNA 分子,因此,你需要重复变性、退火和 DNA 合成步骤。你现在有四个双链 DNA 分子,您再次重复步骤,你现在有八个,依次类推就可以复制多个。

PCR 应用

PCR 使用非常广泛, PCR 被用于许多研究实验室,并在法医学,基因检测和诊断方面也有实际应用。例如, PCR 用于从患者的 DNA 中(或在产前检测的情况下从胎儿 DNA 中)扩增与遗传疾病相关的基因。 PCR 还可用于测试患者体内的细菌或 DNA 病毒:如果存在病原体,则可以从血液或组织样品中扩增其 DNA 区域。

关于 PCR 就介绍这里,上海金沙也有 PCR 试剂盒,专为科研实验使用。如果您对 PCR 及试剂盒感兴趣,也欢迎来电。